جداسازی و کلون کردن hbeag و ساخت سوش بیانی pichia pastoris برای این آنتی ژن

thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس
author فاطمه جهانشیری
adviser فرزین روحوند
Number of pages: First 15 pages
publication year 1379

abstract

در این پژوهش ژن hbeag از ژنوم کامل hbv سویه ayw با روش pcr جداسازی شد. محصول pcr پس از تخلیص و آنالیز با آنزیم های محدودکننده و انجام مراحل کلونینگ در وکتور puc18 جهت بررسی نهایی به وسیله واکنش های ترادف یابی(sequancing) با تکنیک alf مورد تایید قرار گرفت . در مرحله بعد ژن e آنتی ژن در وکتورهای بیانی phild2 و phils1 که وکتورهای دوسو(shuttle) برای مخمر pichia pastoris و باکتری e.coli می باشند، تحت پروموترaox1، کلون گردید. آنالیزهای آنزیمی صحت ساختار پلاسمید نوترکیب را از لحاظ جهت قرارگیری ژن و ترادف اجزاء واحد بیانی، مورد تایید قرار داد. پلاسمیدهای نوترکیب phild2e و phils1e به صورت خطی (linearized) جهت ترانسفرم کردن p.pastoris با 4 روش ترانسفورماسیون لیتیوم کلراید، 1000 peg ، الکتروپوراسیون و اسفروپلاست بکار رفتند. غربال کلنی های ترانسفرم شده بر روی محیط حداقل، مشاهدات میکروسکوپی، استخراج ژنوم مخمرهای نوترکیب و انجام آنالیز pcr ، ساخت سوش بیانی pichia pastoris برای hbeag را مورد تایید قرار داد. بررسی نتایج روشهای مختلف ترانسفورماسیون نشان داد که اسفروپلاست موثرترین روش ترانسفرم کردن این مخمر می باشد.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

جداسازی سویه قارچی مولد اسیدپروتئاز و کلون سازی و بیان ژن پروکیموزین در مخمر pichia pastoris

چکیده ندارد.

15 صفحه اول

طراحی و ساخت وکتور بیانی جدید در مخمر pichia pastoris دارای پروموتر القایی fmd وتوالی histag

عنوان: طراحی وساخت وکتور بیانی جدید در مخمر pichia pastoris دارای پروموتر fmd سلول های مخمری با توجه به میزان بیان بالا و سرعت رشد مناسب، میزبان های ایده آلی برای تولید پروتئین های نوترکیب در صنعت محسوب می شوند. از مخمرهای صنعتی می توان به مخمر متیلوتروف pichia pastoris اشاره کرد. اغلب برای بیان پروتئین نوترکیب در مخمر p. pastoris از پروموتر قوی و القایی aox1 استفاده می شود. یکی از مشکلات استف...

کلون کردن ژن جهش یافته آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس(PA) در باسیلوس سوبتیلیس

سابقه و هدف: آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس پروتئینی با خاصیت اتصال به گیرنده های سطح تمام سلول های بدن انسان می باشد. در سطح سلول های سرطانی گیرنده اختصاصی فعال کننده یوروکینازی پلاسمینوژن (uPA) ایجاد می شود که در سطح سایر سلول های نرمال بدن مشاهده نمی شوند. هدف از انجام این تحقیق تغییر جایگاه اتصال موجود بر روی PA با جهش زایی مستقیم می باشد به نحوی که این پروتئین فقط بتواند به ...

full text

جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز باکتری ترموبیفیدا فوسکا

سابقه و هدف: آنزیم کوتیناز متعلق به خانواده سرین هیدرولازها است و به دلیل خواص ساختاری و عملکردی در حذف آلودگی های زیست محیطی اهمیت بسیار زیادی دارد. هدف از این پژوهش، جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز از باکتری ترموبیفیدا فوسکا (Thermobifida fusca) بود. مواد و روش‌ها: نمونه برداری از خاک های جنگلی شمال ایران صورت گرفت. با استفاده از محیط کشت اخت...

full text

جهش زایی ، کلون کردن و تعیین ترادف بازی ژن آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس در اشرشیاکلی

زمینه: آنتی‌ژن ایمنی‌بخش باسیلوس‌آنتراسیس (PA) پروتئینی با خاصیت اتصال به گیرنده‌های سطحی سلول‌های بدن انسان می‌باشد ولی در سطح سلو‌ل‌های سرطانی گیرنده اختصاصی uPA (Urokinase plasminogen activator) ایجاد می-شود که این پروتئین قدرت اتصال به آن‌‌‌‌را ندارد. هدف از انجام این تحقیق تغییر جایگاه اتصال موجود بر روی PA با جهش‌زایی مستقیم می‌باشد که این پروتئین فقط بتواند به سلول‌های سرطانی متصل گردد. ...

full text

جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز باکتری ترموبیفیدا فوسکا

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس

Keywords

ویروس هپاتیت ب دارو درمان

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com